viernes, 27 de agosto de 2010

CORTES PARA MICROPROPAGACION

A continuación se mencionan algunas de las características de los diferentes tipos de cortes:
1) Cortes de hojas. Algunas especies herbáceas, como las violetas africanas y las peperomias, producen raíces a partir de sus hojas y posteriormente tallos; sin embargo, esto no ocurre con facilidad en la mayoría de los árboles. de otro tipo de segmentos es escasa. Los cortes que incluyen además de la hoja una yema axilar y un fragmento de rama son adecuados para propagar algunas plantas —como las camelias y los rododendros, que son especies leñosas— y también se utilizan para propagar árboles cuando la cantidad disponible
2) Cortes de raíz. La capacidad de muchos árboles de producir ramas a partir de sus raíces (en condiciones adecuadas de crecimiento) se utiliza para propagar algunas plantas, como los plátanos y los guayabos.
3) Cortes de ramas. La propagación vegetativa mediante segmentos de ramas o brotes es uno de los métodos más usados para propagar plantas leñosas en vivero. Según las características de madurez de la madera de donde se obtienen las ramas o brotes, los cortes se han dividido en cortes son: de maderas duras, semiduras y suaves. Aunque las diferentes fases de maduración se presentan de manera continua, generalmente se distinguen por la forma y el color de las hojas y por los cambios de coloración del tallo o ramas. Las técnicas de propagación de árboles por medio de cortes de ramas se dividen en dos tipos básicos: de segmentos foliados y de segmentos defoliados. Cada uno de éstos utiliza cortes de madera con un grado de maduración diferente, y como proceden de árboles de contrastante ciclo fenológico, esta diferencia se relaciona con la acumulación de reservas en los tejidos del tallo. En los árboles caducifolios, de los cuales se obtienen los segmentos defoliados, antes de la caída de las hojas hay acumulación de reservas, las cuales están destinadas a formar posteriormente hojas nuevas. A partir de estas reservas se generan las raíces y las hojas en el segmento; en cambio, los segmentos foliados por lo general proceden de árboles de hoja perenne, que no acumulan reservas en el tallo y que deben continuar fotosintetizando para producir los necesarios para generar nuevo crecimiento.



hecho por:
sandra milena grass
tatiana gonzales
viviana galindo

lunes, 23 de agosto de 2010

METODOS DE OBTENCION DE ACEITES ESENCIALES

Los aceites esenciales constituyen la fracción volátil de estudio en plantas aromáticas y medicinales, compuesta por terpenos y derivados, derivados del benceno y otros. Se
Uso Industrial de Plantas Aromáticas y Medicinales
determinan por cromatografía de gases (CGL) y espectrometría de masas si es necesario, tras extracción por destilación de arrastre de vapor a presión atmosférica.
La destilación consiste en la separación de los componentes de una muestra en función de la diferencia de presión de vapor y punto de ebullición.
Se conoce como punto de ebullición la temperatura a la cual, a una presión determinada, un líquido pasa a vapor, o la temperatura a la cual la presión del líquido equivale a la del gas alrededor.
Cuando se destila a presión atmosférica, corresponde a una columna de 760 mm Hg. Una reducción de presión disminuye también el punto de ebullición, mientras que un aumento de presión lo eleva.
Una mezcla de componentes no tiene un punto de ebullición, sino un rango. Los distintos aceites esenciales tienen gran variedad de composición y puntos de ebullición, y la destilación se lleva a cabo en función de ello. Los distintos aceites poseen distintos puntos de ebullición, por lo cual la destilación de los mismos ocurre en un rango de temperaturas que suele oscilar entre los 150 y los 300º C.
Cuando la destilación separa los componentes dando lugar a dos fases no miscibles se llama hidrodestilación, y se llevará a cabo en destilador de cristal cuando el peso de la muestra sea inferior a 1 Kg (a escala de laboratorio) y en caldera de acero inoxidable cuando sea superior.
En primer lugar, la planta ha de ser preparada para que los aceites abandonen las glándulas en los que están contenidos, para lo cual se lleva a cabo la molienda, que dependerá del tipo de muestra (hojas, flores, y partes no fibrosas o frutos y semillas).
La muestra se coloca en la rejilla de la caldera y se hace pasar vapor a través de ella, que arrastrará los aceites, los cuales condensan en el condensador. Los efectos de la hidrodestilación son la difusión de aceites a partir de las membranas o hidrodifusión, las hidrólisis de ciertos componentes y la descomposición por calor de los mismos. Los tres fenómenos ocurren simultáneamente, y afectarán el uno al otro.
Hidrodifusión: sólo una pequeña parte de los aceites está presente en la superficie de las plantas, disponible para la vaporización. El resto de los aceites llega a la superficie por difusión a través de los tejidos de la planta, ya sea libre o por ósmosis a través de membranas permeables a uno o todos los componentes. El vapor en la destilación no suele penetrar las membranas, por lo que el proceso se basa en la ósmosis. Ofrece buenas condiciones para ello porque la temperatura y el movimiento del agua aceleran las fuerzas de difusión.
Calor: la temperatura es mínima al inicio de la destilación y se vaporizan los componentes con menor punto de ebullición, y va aumentando hasta llegar a la temperatura de saturación de vapor a la presión dada. Para mayor calidad de los aceites, la temperatura se debe mantener lo más baja posible, o el menor tiempo posible a alta temperatura.
Hidrólisis: es una reacción química entre el agua y los componentes de la planta, de los aceites, en general ésteres, que tiende a formar los ácidos y alcoholes correspondientes. Son importantes la cantidad de agua empleada y el tiempo de contacto entre el aceite y el agua.

Los principios de la hidrodestilación son mantener la temperatura lo más baja posible, sin olvidar que el grado de producción también depende de ella; emplear la menor cantidad de agua o vapor en contacto con la planta, pero favoreciendo la difusión; llevar a cabo una molienda y empaquetado de la muestra cuidadosos pero no excesivos.
La ventaja de este método de extracción es la baja inversión inicial necesaria para adquirir los equipos y accesorios. Se trata de un proceso simple, versátil y flexible, que permite trabajar con grandes volúmenes de materia prima en cada ciclo, incluso sin tratamiento previo. No se altera el tiempo de extracción, pero lo hace el rendimiento.
Los inconvenientes con los que nos encontramos son que se produce degradación térmica en el aceite esencial obtenido, es decir, se inducen cambios químicos e indeseables, como oxidación, hidrólisis y oligomerización y que tiene altos costes operativos por carga de materia prima, a causa de la necesidad de energía para producir el vapor de agua.

OBTENCION DE EXTRACTOS DE PLANTAS

Obtención de los extractos
El objetivo principal del proyecto es determinar la presencia de metabolitos secundarios en 20 plantas silvestres del Parque Nacional Terepaima, así como la identificación de las mismas desde el punto de vista taxonómico.
Luego de recolectar la muestra de las plantas, se realiza un análisis en base a la literatura química para conocer sus propiedades, según Sanabria generalmente se seleccionan especies que tienen referencias.
Las plantas se secan en la sombra y se pulverizan con la ayuda de una licuadora, el polvo resultante es procesado para la obtención de los extractos etanólicos desgrasados (EED) y sin desgrasar (EESD).
-Primero se hacen pruebas in vitro en los laboratorios de la UCLA, que consisten en probar el efecto de esos extractos aplicados a un agar donde se siembra el hongo, se mide el crecimiento del mismo y si el extracto tiene algún efecto, en caso de que sea positivo llevamos esa prueba a campo y aplicamos el ensayo para demostrar los resultados.
"Las conclusiones de los experimentos realizados durante los últimos años demuestran que sí podemos contar con plantas que controlan el crecimiento de hongos en los cultivos, esto significa un mayor beneficio para la obtención de frutas y hortalizas más sanas.

MATERIALES Y METODOS

EXTRACTO ETANOLICO:

#1: A 250 g de material molido se le agraga 200ml de hexano y se deja reposar derante 24 horas a temperatura ambiente.
#2: posteriormente, se filtra el liquido con un papel whatman.
#3: y se repite el proceso por cuatro veces.
#4:luego del ultrimo filtrado, el materil vegetal s deja sacar al temperatura ambiente hasta completar la evaporacion del hexano una vez seco se cubrio con 200 ml de etano al 96% y se mantuvo en reposo durante 24 horas.
#5:nuevamente se filtro y se realizo la extracion del crudo por destilacion en un rotavapor 100°c
#6: y lo repetimos hasta que el alchol no presente color.
#7: el extracto se guarda en el refrigerador a 10°c

EXTRACTO ACUOSA:

#1: se utilizaron 20g de material seco y molido al cual se le practico un prelado con una solucion de hipoclorito de sodio al 0,26% por 2 min y luego 4 lavados de agua destilada y esteril, se agrego 400ml agua doble destilada y esterilizada y se licuo la preparacion po 5 min
#2: luego se filtra utilizando 4 capas de gasa esterilizadas y luego se lleva al congelador.
#3: se utilizaron 20 g de material molido, seco y desengrasado diluido en 300ml de etanol. y le agregamos 1% de cloruro ferrico
#4: al estar el extracto casi seco lo diluimos con KOH 0,5N y lo filtramos, le agregmos acido aceticoy se agito con benceno.
#5: al alcanizar con NH4OH y se manifiesta de con una coloracion rojiza, las cantidades utilizadas fueron menores de 1ml.

ESTRACTO ETANOLICO SIN DESENGRASANTE:

#1: se utilizaron 250gr del material molido se cubrio con 200ml de etanol al 96% y se dejo reposar por 24 horas
#2: posteriormente se filtro y se obtuvo un extracto crudo mediante la destilacion siguiendo el procedimiento del etanolico desengrasado.

hecho por:
viviana marcela galindo.
sandra milena grass.
tatiana gonzalez.
nataly laguna.

lunes, 2 de agosto de 2010

esterilizacion de semillas


materiales
pipeta
vaso de precipitado
h2o destilada
embudo
papel de filtro
vaso de plastico
reactivos
hipoclorito de sodio




procedimiento
1) seleccionamos las semillas
2) en un vaso de precipitado agragamos 50 ml de agua con 10 de HClO
3) agregamos las semillas a la mezcla dicha antes
4) luego utilizamos el embudo para filtrar las semillas y las emjuagamos con H2O destilado
5) agregamos 50ml de H2O destilada a un vaso plastico y sacamos las semillas previamente desterilizadas y las dejamos en el vaso fin.
conclusiones

Que este es unprocedimiento muy rapido y lo podemos hacer facilmente en casa.

micropropagacion


Fases del proceso de micropropagación

Dentro del proceso de micropropagación se pueden diferenciar varias fases o etapas:

  • 1: Desinfección de las yemas de la planta y/o desinfección de semillas
  • 2: Introducción del material seleccionado in vitro
  • 3: Multiplicación de brotes
  • 4: Enraizamiento
  • 5: Aclimatación

Esta secuencia de etapas abarca el ciclo completo de la multiplicación de plantas in vitro y puede ser aplicada a diferentes especies vegetales.

Preparación de la planta madre

Para poder establecer el cultivo en condiciones de asepsia, se deben obtener explantos con un nivel nutricional y un grado de desarrollo adecuado. Para obtener estos explantos es recomendable mantener a las plantas madre, es decir la planta donante de yemas, durante un período que puede oscilar entre unas semanas o varios meses en un invernadero bajo condiciones controladas. En ese ambiente se cultiva la planta en condiciones sanitarias óptimas y con un control de la nutrición y riego adecuados para permitir un crecimiento vigoroso y libre de enfermedades.

Introducción del material in vitro

Luego de la desinfección superficial, las semillas o las yemas dependiendo del material seleccionado, se ponen en medio de cultivo estéril. En un período de una semana o quince días, comienza el proceso de germinación o regeneración de nuevos tejidos vegetales, iniciando el ciclo de cultivo in vitro.

Elección de un medio de enraizamiento de los explantos

Para enraizar los explantos se utilizan principalmente plantines individuales de un tamaño aproximado de 2 cm. Los brotes obtenidos durante la fase de multiplicación se transfieren a un medio libre de reguladores de crecimiento o que solo contenga hormonas del tipo de las auxinas. Algunas especies de plantas no necesitan pasar por esta etapa y emiten sus raíces en el mismo medio de cultivo donde desarrollan yemas nuevas, por lo tanto el proceso de multiplicación y enraizamiento transcurren en forma simultánea.

Bases de la micropropagación La micropropagación es un procedimiento de cultivo de tejidos vegetales in vitro (Kyte & Kleyn 1996). El primer paso del cultivo de tejidos es tomar una porción de material vegetativo, la cual se denomina explante, y a partir de ella se desarrollará una nueva planta, gracias a las propiedades de totipotencialidad y regeneración de las células vegetales.


PROPORCIÓN DE CADA ELEMENTO BÁSICO A MEZCLAR

Abono mineral 20-20-20 (sin urea) 1 gr
Agar 8 gr
Agua 1 Litro
Azúcar comercial 10 gr
Extracto de levadura 1 gr
Complejo de vitamina B 1 ampolla, vial
Otros aditivos (leche de coco, plátano, etc) Leer bajo esta tabla

Se puede añadir también: leche de coco verde filtrada por un filtro normal de café (20 ml por cada litro de medio), papilla de banana (muy fina) a razón de media banana por litro ó 25 ml de zumo de piña natural filtrado (NO el de Tetrabrik), aunque el zumo de piña no lo recomiendo si no se tiene forma de controlar el pH, pues es muy ácido y hay que corregirlo después, necesitando entonces de aparataje. Hay peachimetros muy económicos que siempre son útiles, pero se puede prescindir de ellos.

nota:

" Esterilización de las semillas.
Las semillas solamente pueden ser esterilizadas con productos químicos, pues
otro recurso las mataría. El más fácil de conseguir, y que todos tienen en
casa, es el cloro.
Normalmente el cloro está preparado a la concentración del 2.2%, esta
indicación debe estar en el rótulo y debe ser observada atentamente.
Para desinfectar las semillas se prepara una solución con agua destilada y
cloro, que al final tendrá concentración entre 6% a 10%. Para hacerla,
mezclamos 1 ml de cloro y 10 ml de agua destilada, lo que nos da una
concentración aproximada de 7.5%. "

hecho por: sandra grass
tatiana gonzalez
vivana galindo